來源：奇點糕 常看今日說法之類節目的估計都知道，很多犯罪團伙是“家族式”的，基于各種親情關系一起為非作歹，這就很像人體內的兩種現象，一種是多個治療靶點歸屬同一個家族，比如同屬表皮生長因子受體家族的EGFR和HER2，另一種就是mRNA層面的可變剪接（Alternative splicing），同一個基因由此產生的不同mRNA和蛋白異構體，也算得上“家族”吧[1]。 而可變剪接的影響范圍，甚至包括了PD-1這種大家熟得不能再熟的靶點。近日，東南大學/中國科學技術大學高山團隊與國內研究者合作，在Nature Communications期刊發表的研究成果，就揭示了人體內存在的一種PD-1剪接異構體PD-1^28，它在外周T細胞和腫瘤浸潤淋巴細胞（TILs）上普遍表達且具有免疫檢查點功能，可能參與導致免疫治療耐藥[2]。 其實呢，發現PD-1^28應該算是“不期而遇”，因為研究者們是在健康人外周血單個核細胞（PBMCs）中擴增PDCD1（即PD-1編碼基因）時，意外地發現了PD-1^28的存在，它的得名也是因為在PDCD1第二個內含子的5’端保留了28個堿基，且測序顯示人白血病細胞以及其它癌癥患者的TILs中也存在內源性PDCD1^28的表達；細胞實驗顯示，調控PDCD1^28剪接形成的，是RNA結合蛋白中的TATA盒結合蛋白相關因子15（TAF15）。 初步實驗也顯示，PD-1^28可以與PD-1按相似的方式，即經由CD3或CD28共刺激后激活，那它是否也像PD-1一樣是免疫檢查點呢？研究者們分別將Jurkat細胞和原代T細胞的PDCD1^28水平過表達或敲低，發現PD-1^28對T細胞免疫功能的影響與PD-1呈相同趨勢，即過表達就會抑制免疫功能，敲低則會增強免疫功能和增殖能力，與PD-1^28結合的配體也仍然是PD-L1，可變剪接不會影響二者的結合能力。 后續在進行小鼠實驗時，研究者們沒有在小鼠中找到等同于PD-1^28的同源異構體，不過由于人和小鼠的PD-L1整體結構幾乎完全一致，氨基酸序列也高度保守，研究者們推測人源PD-1^28就足以與小鼠PD-L1結合并發揮免疫抑制作用，因此構建了條件性PDCD1^28敲入小鼠，來進一步評估PD-1^28對抗腫瘤免疫功能的影響。 使用結直腸癌和黑色素瘤模型進行的實驗顯示，敲入PDCD1^28會使腫瘤在小鼠身上的生長速度更快、小鼠生存期明顯縮短，而雖然外周T細胞穩態和腫瘤微環境中的T細胞數量都變化不大，但CD8+TILs的細胞毒效應分子GzmB，以及IFN-γ和TNF兩種炎性細胞因子都顯著下調，說明PD-1^28使CD8+TILs的抗癌戰斗力明顯下降了；讓人的PBMCs過表達PDCD1^28，也會導致CD8+T細胞抗癌能力呈現相似的減弱。 研究者們表示，本次研究提示PD-1^28可能是人體內的潛在免疫檢查點，乃至通過免疫抑制功能參與現有免疫治療的耐藥，下一步工作的目標也將是分析PD-1^28是否參與免疫治療耐藥，如果是的話，就得做針對性干預了。 參考文獻： [1]Zhang Y, Qian J, Gu C, et al. Alternative splicing and cancer: a systematic review[J]. Signal transduction and targeted therapy, 2021, 6: 78. [2]Wang X, Liu T, Li Y, et al. A splicing isoform of PD-1 promotes tumor progression as a potential immune checkpoint[J]. Nature Communications, 2024, 15: 9114.